【技术】关于猪蓝耳病的六大疑问？

问题一、为什么PRRS多发，经常免疫或不免疫，而且发病很严重，造成很大损失？

我想不仅是蓝耳病，我国的猪病都有一个共同的问题，就是诊断的问题。许多猪场在临床现场诊断该病，或者在实验室检测到PRRS病毒后立即诊断为PRRS病毒。这里需要强调的是：PRRS的检测PRRS的存在。

疾病是病原体引起临床影响的过程，病原体可以潜伏在体内，呈持续感染状态，并不一定会出现临床问题。

另一方面，活疫苗多用于PRRS的防控，在一定时间内可检测出疫苗病毒。因此，检测到的病毒如果不进行鉴定，可能会造成临床误诊。

问题二：临床上很多猪群检出PRRS病毒属于正常现象，那么如何判断猪场因PRRS病毒的存在而造成疫情呢？

首先，在没有近期免疫的情况下，使用重复血清的评估格式。

也就是说，猪场一直处于持续监测状态，当感觉临床不稳定时，采血化验，并与原监测时的检测结果进行对比。如果血清PRRSV抗体值在不稳定的时候突然升高，一下子有很大的变化，可以认为是PRRSV的影响。

二是在疫情发生初期，及时剖检并送检标本，对早期有代表性的发病猪进行检测诊断。

如果在疫情早期没有采集样本，或者经过一段时间的各种方法治疗后进行检测，可能的诊断是多种病原体混合感染，而不是本次疫情的病原体。

或许在现实中的大多数情况下，这群患者等到检测结果出来再采取措施进行控制已经来不及了。事实上，在采样检测开始之初，就可以根据临床判断采取控制措施。这样一来，当诊断结果出来的时候，即使之前的判断是错误的，也可以确认病因，这对以后的疫情防控也有指导意义。

问题三：PRRS检测采样的靶组织器官应该是什么？

对于蓝耳病，血液样本是一个很好的目标样本。此外，对发病过程中有临床代表性的猪进行剖检，取病毒检出率高的靶组织（PRRS病毒除外，血液、扁桃体等），肺是最重要的靶器官，肺门淋巴结和下颌淋巴结也可以检测到）。

作为一种PRRS 病毒，其最重要的靶组织是扁桃体和肺。血液作为最容易采集的样本，在PRRS的检测中具有重要意义。

血液中病毒的检测时间比较早。一般感染后3天左右即可从血液中检测出来，持续时间也很长，可达2-3个月。因此，血液作为活体检验是最好的。扁桃体和肺是尸检动物最重要的靶器官。

问题4.如何鉴别PRRS。蓝耳病是否一定意味着蓝耳病？实验室检测如何区分高蓝株和经典株？

蓝耳不一定是蓝耳病，末梢循环障碍时耳朵会变蓝。 PRRS的典型症状是结膜炎，起初可能是浆液性的，后来可能发展成粘液。

在高致病性PRRS期间，20-40%的猪有神经症状，因为PRRS病毒后期会进入脑组织，引起一些神经症状，如运动障碍、抽搐、后肢麻痹等。扁桃体出血、溃疡、肺组织实变。

脓毒症可见脾脏肿大、充血、梗死，但这种肿大与我们在猪瘟和一些细菌性疾病中看到的脾肿大不同，除非后续有继发细菌感染，单一病毒引起的损伤是不容易看到的脾脏极度肿大的那种。

临床上，近年来在PRRSV的鉴定和检测方面做了大量工作。我们用来检测PRRS的PCR方法可能多种多样，有的可能直接检测高致病性PRRS，有的可能检测经典PRRS。

事实上，在所有的病原体检测方法中，并没有所谓经典的PRRS病毒，只有PRRS病毒通用的RT-PCR。因为PRRS病毒的一般检测方法是针对PRRS病毒最保守的片段设计的引物，不同的引物具有不同的灵敏度。作为PRRS病毒的检测方法，使用最保守的片段引物是最灵敏的。我们一般检查用的RT-PCR就是这样一种方法。

例如，用RT-PCR方法进行普检，10个样本中有8个呈阳性，而用RT-PCR方法（引物）检测突变株，10个样本中有6个原来呈阳性。

并不是说漏检的2个弱阳性就是经典菌株，而是因为两种方法的灵敏度不同，所以没有检测到2个弱阳性样本。如果送去测序，可能都是突变株。所以用一般的检测RT-PCR方法只能告诉你PRRS病毒检测呈阳性，而不能确定是哪个毒株。

然后用检测突变株的RT-PCR方法检测出部分阳性部分阴性，因为后一种方法的灵敏度低于一般的检测方法。原来的强阳性现在是阳性，弱阳性是阳性。阴，而且变成负的部分不能说是经典曲调。

部分领域既有高致病性的也有经典的PRRS检测，这可能是由于检测方法的敏感性不同导致对检测结果的误解。如果一般检查的结果是阳性，还需要再进行一次鉴别检查，告诉你是什么病毒株。

问题5.如何鉴别PRRS与临床症状相似的疾病？

对具有相似或相同临床症状的疾病进行鉴别诊断非常重要。在某些领域，就临床诊断而言，将其他疾病引起的症状归因于PRRS。例如，在2012年伪狂犬病流行株引起的猪伪狂犬病暴发点，病猪肺实变与高致病性蓝耳病相似，但在组织切片中发现情况却大不相同。

病猪肺部组织学上可见坏死灶，这是伪狂犬病的典型病变，因为灶性坏死是伪狂犬病的组织学特征。但PRRS病毒主要在肺泡2型细胞和巨噬细胞中增殖，除间质性肺炎外，肺组织无其他变化。

随后的肺免疫组织化学染色检测到伪狂犬病病毒，但未检测到PRRS 病毒。这些临床上相似的疾病可以在组织学上清楚地区分。

问题6.PRRS病毒检测还需要什么

实际上蓝耳病毒的抗体检测方法有很多，但是对现在大规模样品检测来说，ELISA是一个相对方便能够在临床上推广应用的方法。ELISA方法有很多商品化试剂盒，在国内用的最多的是两类。一类是N蛋白包被的试剂盒，一类是糖蛋白包被的试剂盒。

那么这两类试剂盒的蛋白包被是一个什么关系呢?

与病毒免疫原性相关性更好的是膜上的糖蛋白，而病毒感染首先激发的是跟核酸相关的N蛋白。

那么在临床下什么情况下该选什么蛋白包被的试剂盒呢?

N蛋白激发抗体产生时间很早，如果是一个没有感染过蓝耳病的地区或场，一定是用N蛋白来做防控预警。还有就是做双份抗体的检测，一旦出现N蛋白抗体在没有免疫的情况下出现一个跳升，一定和蓝耳病毒感染发病相关性很大。

而作为疫苗的免疫效果的，则与糖蛋白相关性大，N蛋白产生的抗体只代表是不是有感染，与中和抗体及攻毒保护结果相关性不大。N蛋白抗体出现早，但是持续时间相对短，且与免疫保护相关性较小。糖蛋白抗体产生时间晚，且持续时间长，与免疫保护相关性更好，所以通常用它来做免疫后抗体水平监测，监测猪群是否处在保护状态。